Los Custom Pin-point™ Synthetic sgRNAs permiten diseñar guías CRISPR personalizadas para experimentos de edición genética dirigida o edición de bases, ofreciendo flexibilidad para trabajar con diferentes sistemas basados en Cas9.
La plataforma permite introducir secuencias objetivo específicas proporcionadas por el usuario, a partir de las cuales se generan sgRNA sintéticos optimizados. Para el sistema Pin-point™, se introduce una secuencia objetivo de 20 nucleótidos, a la que se añade automáticamente la región repetida necesaria para formar el sgRNA funcional. Estas guías están diseñadas para trabajar en combinación con Pin-point nCas9 mRNA y Rat APOBEC mRNA, permitiendo realizar conversiones precisas de bases sin generar rupturas de doble cadena en el ADN.
Además del formato específico para Pin-point™, la herramienta admite el diseño de guías para otros sistemas CRISPR-Cas9, incluyendo:
- Synthetic sgRNA para Streptococcus pyogenes Cas9, a partir de secuencias objetivo de 17–23 nucleótidos.
- crRNA para diferentes especies de Cas9, introduciendo secuencias completas de 35–45 nucleótidos que incluyan región objetivo y repetición.
sgRNA completos (97–103 nucleótidos) que integran la secuencia objetivo, la región repetida, el linker y la secuencia tracrRNA.
Estos reactivos permiten adaptar los experimentos de edición genética a objetivos específicos, facilitando aplicaciones como introducción de mutaciones puntuales, knockout génico o estudios funcionales dirigidos. Cabe destacar que las secuencias objetivo no deben incluir la secuencia PAM, ya que esta forma parte del reconocimiento del sistema Cas9 en el genoma.
